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双萤光素酶报告基因检测试剂盒

产品简介：

双萤光素酶报告基因检测试剂盒(Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit)，是先以萤光素(luciferin)为底物来检测萤火虫萤光素酶(Firefly luciferase)，后以肠腔素(coelenterazine)为底物来检测海肾萤光素酶(Renilla luciferase)，并且在后续加入海肾萤光素酶底物时，同时加入抑制萤火虫荧光素酶催化luciferin发光的物质，使后续检测仅仅检测到海肾萤光素酶的活性，实现双萤光素酶报告基因检测。

萤火虫萤光素酶是一种分子量约为61kD的蛋白，在ATP、镁离子和氧气存在的条件下，可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物萤(bioluminescence)。海肾萤光素酶是一种分子量约为36kD的蛋白，在氧气存在的条件下，可以催化coelenterazine氧化成coelenteramide，在coelenterazine氧化的过程中也会发出生物萤光。生物萤光可以通过化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪进行测定。

萤火虫萤光素酶催化luciferin发光的最强发光波长为560 nm。海肾萤光素酶催化 coelenterazine发光的最强发光波长为465 nm。

通常将目的基因的5´UTR或者启动子克隆至Firefly Luciferase的上游，或者3´UTR克隆至Firefly Luciferase的下游，通过检测萤火虫荧光素酶的量来检测启动子或者调控元件的转录调控作用。Renilla Luciferase作为内参，来消除细胞数量或者转染效率的差异。

产品组成:

使用方法：

见说明书

注意事项：

1. 无菌操作。

2. 荧光染料操作中注意避光进行。

3. 为保证荧光素酶检测试剂的稳定性，可以采取适当分装后避光保存的方法，以避免反复冻融和长时间暴露于室温。

4. 萤火虫荧光素酶检测试剂、Renilla 荧光素酶检测试剂最好现用现配。

5. 细胞裂解液及裂解时间可根据细胞量适当增加、延长。

6. 关于检测仪器的选择：能够检测化学发光或者生物发光的仪器都可适用于此试剂盒。如果使用多功能酶标仪，为防止各孔之间的干扰，我们推荐使用黑色酶标板，并且不同实验组之间最好有间隔。

7. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

1、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

-20℃保存六个月。